Nghiên cứu này nhằm xác định môi trường nhân giống phù hợp cho chủng nấm dược liệu Cordyceps cicadae (C. cicadae) với ký hiệu Cordy-NH4 và đánh giá khả năng phát triển trên vật chủ trong điều kiện nuôi trồng nhân tạo. Thí nghiệm được bố trí hoàn toàn ngẫu nhiên với bốn công thức môi trường ở hai giai đoạn nhân giống: cấp 1 (môi trường thạch) và cấp 2 (môi trường lỏng). Kết quả cho thấy môi trường SDAY là phù hợp cho cả hai giai đoạn nhân giống. Ở giai đoạn nhân giống cấp 1, đường kính trung bình tản nấm đạt 23,27 ± 0,37 mm sau 8 ngày nuôi cấy. Ở giai đoạn nhân giống cấp 2, sinh khối khô đạt cực đại 10,11 ± 0,02 mg/mL sau 5 ngày nuôi cấy ở điều kiện lắc với tốc độ 125 vòng/phút, nhiệt độ 21 °C và trong môi trường tối. Thử nghiệm nuôi cấy trên vật chủ nhộng tằm và sâu chít cho thấy quả thể nấm xuất hiện sau 9 - 10 ngày, với chiều dài trung bình đạt trong khoảng 29,78 - 35,89 mm sau 45 ngày. Kết quả nghiên cứu xác định môi trường SDAY phù hợp cho giai đoạn nhân giống của chủng Cordy-NH4, đồng thời cho thấy nguồn giống tạo thành có khả năng phát triển và hình thành quả thể trên vật chủ trong điều kiện nuôi trồng nhân tạo, qua đó cung cấp cơ sở khoa học cho các nghiên cứu tiếp theo nhằm hoàn thiện quy trình sản xuất giống và nuôi trồng C. cicadae ở Việt Nam.