BIỂU HIỆN CHITINASE 42 kDa CỦA Trichoderma asperellum SH16 TRONG Pichia pastoris GS115
Nguyễn Hoàng Lộc, Vũ Đức Hoàng, Nguyễn Đức Huy
Mục đích của nghiên cứu là thiết lập một hệ thống biểu hiện thích hợp cho chitinase từ Trichoderma asperellum với promoter mạnh trong nấm men. Gen chi42 mã hóa chitinase từ T. asperellum SH16 được khuếch đại bằng PCR. Đoạn khuếch đại sau đó được đưa vào vector biểu hiện pPICZαA chứa promoter AOXI, tiếp theo là biến nạp vector tái tổ hợp pPICZαA-chi42 vào nấm men Pichia pastoris GS115 bằng phương pháp sốc nhiệt. Các kết quả thu được cho thấy hoạt tính chitinase ngoại bào đạt cao nhất là 2,85 unit/mL khi nuôi các tế bào nấm men trong môi trường YPL có cảm ứng methanol 3,5% tại thời điểm OD600 = 2 trong 4 ngày ở 30oC. Hoạt tính của chitinase tái tổ hợp từ nấm men gấp 2 lần so với chitinase tự nhiên từ T. asperellum SH16./.