Bằng các phương pháp sắc ký, chúng tôi phân lập được hợp chất phyllanthin và hypophyllanthin từ cây Diệp hạ châu (Phyllanthus urinaria L.).  Cấu trúc của hợp chất này được xác định bằng các phương pháp phổ ¹H-NMR, ¹³C-NMR và ESI-MS). Hợp chất này được tinh sạch (độ tinh khiết > 99,8%) bằng hệ thống sắc ký lỏng điều chế, được sử dụng để làm chất chuẩn phân tích hàm lượng phyllanthin và hypophyllanthin trong cây Diệp hạ châu bằng sắc ký lỏng ghép nối khối phổ (LC-MS/MS). Chúng tôi xây dựng được chương trình sắc ký sử dụng hệ thống LC-MS/MS như sau: pha tĩnh cột sắc ký EC-C₁₈ (100 x 2,1 mm, 2,7 μm), pha động: MeOH (A) – hỗn hợp dung dịch chứa 10 mM ammonium acetate và 0,1% HCOOH (B) theo tỉ lệ 60:40 (v/v), tốc độ dòng: 0,3 ml/phút thể tích tiêm mẫu: 1 μl; nhiệt độ buồng cột: 35 ^oC; thời gian phân tích 10 phút, dung môi pha mẫu: MeOH-H₂O = 60:40 (v/v). Điều kiện khối phổ bao gồm nguồn ion hóa ESI, loại ion dương, nhiệt độ nguồn ion hóa là 300 ^oC, chế độ chạy MRM trong đó phyllanthin với ion sơ cấp m/z 436,0 và ion thứ cấp m/z 151,0, hypophyllanthin với ion sơ cấp m/z 261,0 và ion thứ cấp m/z 231,0. Phương pháp phân tích chúng tôi sử dụng tối ưu hóa cho quá trình phân tích 2 hợp chất hypophyllanthin và phyllanthin trong cây Diệp hạ châu với độ tuyến tính, độ đúng và độ chính xác cao.