Để ứng dụng trong y - sinh học, việc chức năng hóa và định lượng nhóm chức COOH trên bề mặt hạt nano Fe₃O₄ đóng vai trò rất quan trọng. Hạt nano Fe₃O₄ gắn nhóm chức carboxyl đã được chế tạo thành công bằng phương pháp hóa đơn giản và dễ thực hiện, thông qua sự kết hợp của hạt nano Fe₃O₄ với phức chất silane có chứa gốc COOH. Phức chất này là sản phẩm của phản ứng giữa Succinic anhydride (SA) và aminopropy trithoxysilane (APTES). Hạt nano Fe₃O₄-COOH chế tạo được có tính chất siêu thuận từ với từ độ bão hòa kỹ thuật cao (~22 emu/g), đồng thời nồng độ nhóm chức carboxyl trên bề mặt hạt nano Fe₃O₄ đã được định lượng dựa trên phương pháp sử dụng chất chỉ thị xanh Methylene (MB) thông qua phổ hấp thụ hồng ngoại khả kiến (UV-vis).